当前位置:首页 >百科 >天山雪莲细胞培养技术、化学成分和药理作用研究进展 (二) 分别为12.13g/L和620.08mg/L

天山雪莲细胞培养技术、化学成分和药理作用研究进展 (二) 分别为12.13g/L和620.08mg/L

2025-05-10 13:16:55 [百科] 来源:墨澜云栈

1.2悬浮培养

在愈伤组织培养基础上开展悬浮细胞培养技术研究,天山是实现细胞规模化生产、进而实现细胞培养产业化的雪莲细胞必经之路。以提高生物量、培养提高活性物质含量为目的技术究进,研究人员对天山雪莲细胞悬浮培养技术进行了系统的化学和药研究,比较了反应器类型、成分培养体系、理作生物合成前体、用研诱导子类型以及光谱特性等因素对细胞悬浮培养结果的天山影响。

1.2.1反应器类型

应用间歇浸没式小反应器培养天山雪莲细胞,雪莲细胞发现在培养初期0~6d细胞生长缓慢,培养到15d时生物量和黄酮的技术究进产量达到最大值,分别为12.13g/L和620.08mg/L,化学和药生物量只有摇瓶培养的成分2/3;应用气升式反应器培养天山雪莲细胞,发现培养初期0~3d细胞生长缓慢,理作3d后细胞开始快速生长,到第15天时达到最大值11.7g/L,培养过程中黄酮含量除在第3天有一个轻微的上升外,一直呈下降趋势。2种反应器培养雪莲细胞过程中pH和电导率与摇瓶培养相比变化缓慢。

1.2.2培养体系

通过比较不同的基础培养基对雪莲细胞培养的影响,发现MS培养基最有利于细胞的生长,怀特培养基中的细胞黄酮含量最高,而在B5培养基中获得最高黄酮产量。通过考察不同培养基、培养基初始pH、碳源、接种量、植物生长物质含量对雪莲细胞生长和黄酮合成的影响,结果发现,N6液体培养基在pH5.8、蔗糖50g/L、接种量60~80g/L时有利于细胞生长和黄酮合成,附加BA0.2mg/L+NAA2mg/L有利于黄酮合成,而附加BA0.5mg/L+NAA3mg/L则对生长有利。应用培养基MS+NAA5.0mg/L+蔗糖3%,在pH5.8、振荡器转速(120±5)r/min、培养温度(24±1)℃、光照周期12h/d以及光照强度85μmol·m-2/s培养条件下,采用最佳接种质量浓度2.53g/L,在悬浮培养14d时细胞的干重和鲜重均达到最大,分别为16.85、235.28g/L。

1.2.3有机添加物

添加苯丙氨酸和水解酪蛋白能够显著地提高黄酮的合成量,分别比未添加对照提高了47.68%和21.59%;添加椰乳显著地提高细胞生长,生物量比对照提高了36.1%。

1.2.4外源添加碳源和生物合成前体

在每升培养基添加蔗糖50g和生物合成前体L-苯丙氨酸500mg的优选培养条件下,仅需培养16d,紫丁香苷、绿原酸和1,5-二咖啡酰奎尼酸的质量浓度即可以分别达到339.0、225.3、512.7mg/L;三者的含量分别为野生药材的67.9、1.9、10.6倍。

1.2.5添加诱导子

1.2.5.1非生物诱导子

在培养的第14天添加浓度为50μmol/L的一氧化氮,总黄酮量和产量的最大值分别为46.15mg/g和830.7mg/L;在第14天添加浓度为50μmol/L的水杨酸,总黄酮量和产量的最大值分别为46.81mg/g和701.79mg/L;在第6天添加浓度为100μmol/L的茉莉酸甲酯,总黄酮量和产量的最大值分别为52.33mg/g和924.67mg/L。3种非生物诱导子均能促进总黄酮含量和苯丙氨酸代谢途径关键酶PAL活性的增加,除水杨酸外,也能促进细胞生物量的增加。25mg/L的壳聚糖诱导子对生物量没有明显的促进作用,但能显著地促进黄酮的合成,最大的黄酮产量高达1243.5mg/L,比对照提高了33%。

1.2.5.2生物诱导子

5种真菌诱导子F1817、F1832、F1780、F1953、F2563均能促进次生代谢产物总黄酮和紫丁香苷的积累,诱导效果最好的为诱导子F1953,总黄酮和紫丁香苷含量均达到最大值,质量分数分别为46.56mg/g和3.03mg/g。

1.2.5.32类诱导子联合使用

通过非生物诱导子(一氧化氮、水杨酸和茉莉酸甲酯)和生物诱导子(F1817、F1832、F1780、F1953和F2563)的联合诱导提高了天山雪莲细胞有效成分的含量,细胞中总黄酮量最大值为60.41mg/g,是野生药材的3.00倍;培养物中紫丁香苷量达到3.10mg/g,是野生药材的11.48倍。

1.2.6光谱特性

红光最有利于细胞的生长,在红光下获得最大生物量;蓝光最有利于黄酮的合成,在蓝光下获得最大黄酮含量和产量。蓝光加白光的组合有利于黄酮的合成。

1.3毛状根培养

天山雪莲这一品种的细胞培养技术研究主要集中于愈伤组织培养和悬浮细胞培养,毛状根培养的报道较少。付春祥等利用发根农杆菌R1601、R1000、LBA9402感染新疆雪莲的叶片、叶柄和根段外植体,诱导产生毛状根。毛状根接种量为2.8g/L时,20d生长量可达66.7g/L,黄酮含量达到干重的10.23%。冠瘿碱的检测和rolB基因的PCR分析表明,Ri质粒中的T-DNA片段已经整合到毛状根细胞的基因组中。预培养2d的新疆雪莲根段外植体,经过R1601感染后,毛状根的诱导率可达100%,说明预培养时间、外植体类型以及发根农杆菌的菌株属性对毛状根诱导有着重要的影响。乔献丽等研究了外源激素GA3和IAA对3个转基因新疆雪莲类黄酮高产毛状根系C17、C27、C46总黄酮含量的影响,结果表明,与未用激素处理的毛状根相比,外源激素GA3和IAA能显著提高毛状根培养物中芹菜素和总黄酮的含量。毛状根系的组织干重与类黄酮的含量没有相关性。

声明:本文所用图片、文字来源《中国中药杂志》,版权归原作者所有。如涉及作品内容、版权等问题,请与本网联系删除。

相关链接:真菌基因细胞

(责任编辑:时尚)

    推荐文章
    • 海岛战争限时礼包免费领取途径及详细操作步骤指南

      海岛战争限时礼包免费领取途径及详细操作步骤指南在热门策略手游海岛战争中,限时礼包是玩家提升战力、解锁稀有资源的重要途径。为帮助玩家高效获取免费福利,将系统梳理当前有效的礼包领取方式,并提供全流程操作指引。所有信息均基于游戏最新版本及官方活动规则整 ...[详细]
    • 从餐饮市场看消费动能

      从餐饮市场看消费动能年夜饭抢手 生鲜食品畅销 外带年菜走俏从餐饮市场看消费动能核心阅读年夜饭预订火热,餐饮供给积极适应市场需求;生鲜食品畅销,民生商品保障工作扎实推进;外带年菜等走俏,创新升级趋势明显……春节将至,餐饮消 ...[详细]
    • 塑造高质量发展新动能、新优势

      塑造高质量发展新动能、新优势广东着力推动产业与科技互促双强塑造高质量发展新动能、新优势本报广州2月18日电记者胡健、程远州、洪秋婷)18日,春节后的第一个工作日,广东省召开全省高质量发展大会。参会代表中,企业界和科技界代表超过一 ...[详细]
    • 推动科技赋能 弘扬企业价值_

      推动科技赋能 弘扬企业价值_安徽光智科技有限公司于2018年成立,是上市公司光智科技的核心研发和生产基地。公司致力于红外材料、镜头、探测器以及整机系统的研制和生产,其产品广泛应用于安防监控、自动驾驶、智能巡检、医疗诊断和工业检测 ...[详细]
    • 疯狂动物园芝麻官爆笑图鉴全解析:角色档案与趣味故事一览

      疯狂动物园芝麻官爆笑图鉴全解析:角色档案与趣味故事一览疯狂动物园芝麻官爆笑图鉴作为国产动画领域的现象级作品,以动物城公务员体系为叙事场域,构建出充满解构主义色彩的现代职场寓言。该作品通过拟人化动物公务员群像的荒诞日常,成功实现了对官僚体制、职场规则与人性 ...[详细]
    • 维护债市稳定 央行拟借入国债

      维护债市稳定 央行拟借入国债在接连“喊话”提醒长债风险后,央行将于近期开展国债借入操作。人民银行网站7月1日消息,为维护债券市场稳健运行,在对当前市场形势审慎观察、评估基础上,人民银行决定于近期面向部分公 ...[详细]
    • 全国青年科普创新实验大赛宿州市分赛区比赛开赛

      全国青年科普创新实验大赛宿州市分赛区比赛开赛日前,由市科协、市教体局、团市委、市学联主办,市科技馆承办的第十一届全国青年科普创新实验暨作品大赛安徽赛区宿州市分赛区比赛,在宿城第一初级中学校本部举行。来自全市的600余支队伍,1000余名选手参赛 ...[详细]
    • 积极回馈投资者 近百家上市公司发布中期分红预案

      积极回馈投资者 近百家上市公司发布中期分红预案业内专家分析称,投资者分享上市公司成长带来的收益和回报是资本市场高质量发展的基础,在监管层的引导及相关监管下,上市公司积极实施现金分红,对上市公司高质量发展和资本市场的健康运行都具有重要意义。今年以来 ...[详细]
    • 新疆维吾尔自治区政协原副主席窦万贵受贿案一审开庭

      新疆维吾尔自治区政协原副主席窦万贵受贿案一审开庭2025年4月18日,广西壮族自治区柳州市中级人民法院一审公开开庭审理了新疆维吾尔自治区政协原党组成员、副主席窦万贵受贿一案。柳州市人民检察院起诉指控:2003年至2022年,被告人窦万贵利用担任新疆 ...[详细]
    • 中国汽车工业协会: 坚决反对欧委会对华电动汽车加征高额关税

      中国汽车工业协会: 坚决反对欧委会对华电动汽车加征高额关税8月20日,欧盟委员会对中国电动汽车反补贴调查进行终裁信息披露,将对中国产电动汽车加征高额关税。对此,8月21日中国汽车工业协会回应称,欧委会仲裁信息严重歪曲中国电动车产业事实,中国汽车工业协会代表中 ...[详细]
    热点阅读